ATP含量检测试剂盒

货号：YX09117

规格：50T/48S

储存条件：具体以标签为准

有效期：6个月

检测意义：

三磷酸腺苷(adenosine 5-triphosphate,ATP)是生物体内能量转换基本的载体,其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。ATP 作为重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP 水平的改变,会影响许多细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP 水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内 ATP 水平。通常 ATP 水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时 ATP 水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生状态。 ATP 含量测定试剂盒可以用于检测红细胞或组织内的 ATP 水平。

测定原理: 肌酸激酶催化三磷酸腺苷和肌酸,生成磷酸肌酸,用磷钼酸比色法进

行检测

样本处理:

1、红细胞:抗凝全血取下层压积红细胞,一般按 1:4 的体积比加双蒸水进行稀释,再 混匀使溶血完全,制备成溶血液。将制好的溶血液加入玻璃试管中沸水加热煮 10 分 钟,取出混匀抽提 1 分钟,4000 转/分钟离心 10 分钟,取上清液待测。

2、组织样本:准确称取组织称重,按重量(g):体积(mL)=1：9 的比例,加入 9 倍体积的沸双蒸水,制成 10%的匀浆液,再置于沸水浴中煮 10 分钟,取出混匀抽提 1 分钟,3500 转/分离心 10 分钟,取上清液待测。

3、培养细胞:先离心处理将细胞与培养上清分离,除去培养上清,得到下层沉淀细胞 (一般细胞数量达到 106),将收集好的细胞加入 300～500uL 热双蒸水,置于热水浴 (90-100℃)中匀浆破碎,后将细胞悬液于沸水浴中加热 10 分钟,取出混匀抽提 1 分钟,即可用于测定(如果存在大块细胞碎片,需离心后取上清测定)。

注:混匀抽提 1 分钟即为漩涡混匀 1 分钟。

注意事项:

1、此法具有微量、灵敏、快速的特点。对测定所用试管要求严格,要求不能有任何磷污染,建议使用全新一次性塑料试管,避免磷污染是检测成败的关键;

2、显色应用液配好后,不可放置太久,一般可保存五天,好现用现配。随时放冰箱 。

3、组织匀浆宜用 2%~5%浓度的匀浆上清,若样本浓度过高,则底色过深(对照管 OD 过 高)需稀释后再进行测定;一般通过做预试验将对照 OD 值控制在 1.0 以下

4、为了您的安全与健康，实验时请穿戴防护服并佩戴一次性手套。

5、本产品仅供科研实验用，不做其他用途。