获得的DNA纯度高,可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。
注意事项
1. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段较小且提取量下降。
2. 若缓冲液 GA 或 GB 中有沉淀,可在 37°C 水浴中重新溶解,摇匀后使用。
3. 所有离心步骤均为使用台式离心机,室温下离心,速度为 12,000 rpm(~13,400×g)。
DNA 浓度及纯度检测
得到的基因组 DNA 片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。
回收得到的 DNA 片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
DNA 在 OD260处有显著吸收峰,OD260值为 1 相当于大约 50 μg/ml 双链 DNA、40
μg/ml 单链 DNA。
OD260/OD280比值应为 1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用 ddH2O,比值会
偏低,因为 pH 值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
菌量:2 ml;上样量:1μl;琼脂糖凝胶浓度:0.7%,120V恒压,电泳30min。
储存条件:本试剂盒于常温 (15-25℃)运输,室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。温度较低时,有的溶液可能产生沉淀,使用在37℃水浴中加热,直至沉淀消失。
主要应用:使用本试剂盒得到的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。