新品推荐-溶酶体红色荧光探针
Lyso-Tracker Red是种溶酶体(lysosome)红色荧光探针,可以用于活细胞溶酶体特异性荧光染色。
Lyso-Tracker Red可以选择性地滞留在偏酸性的溶酶体中,从而实现对于溶酶体的特异性荧光标记。
中性红(Neutral Red)和吖啶橙(Acridine Orange)也都可以对溶酶体进行荧光染色,但中性红和吖啶橙的染色缺乏特异性。
Lyso-Tracker Red呈红色荧光,检测时的大激发波长为577nm,大发射波长为590nm。
按照1:20000的比例稀释,可以配制1000ml Lyso-Tracker Red工作液。
使用说明:
1. Lyso-Tracker Red工作液的配制:
a. 取少量Lyso-Tracker Red按照1:13333-1:20000的比例加入到细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中,使终浓度为50-75nM。例如取1µl Lyso-Tracker Red加入到20ml或13.33ml细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中。混匀后即为Lyso-Tracker Red工作液。HBSS with Ca2+ & Mg2+ 。
b. Lyso-Tracker Red工作液使用需37℃预温育。
注:工作液中Lyso-Tracker Red的浓度可以根据实际情况进行适当调整。为降低背景,在染色效果可以接受的范围内,建议尽量使用较低浓度的Lyso-Tracker Red。
2. 溶酶体的荧光标记:
a. 去除细胞培养液,加入步骤1配制好的并37℃预温育的Lyso-Tracker Red染色工作液,与细胞37℃共孵育30-120分钟。
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b. 去除Lyso-Tracker Red染色工作液,加入新鲜的细胞培养液。
c. 随后通常用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察。此时可观察到溶酶体呈明亮的强荧光染色。如果染色效果欠佳,可以提高Lyso-Tracker Red染色工作液中Lyso-Tracker Red的浓度或在推荐的时间范围内适当延长染色时间。
注意事项:
Lyso-Tracker Red(1mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。对于微量的液体,每次使用先离心数钟,使液体充分沉降到管底。
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴次性手套操作。