植物6-苄氨基喋呤(6BA)检测试剂盒真的太好用了!
检测目的
本试剂盒用于测定植物血清、血浆及相关液体样本中6-苄氨基喋呤(6BA)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物6-苄氨基喋呤(6BA)水平。用纯化 的植物6-苄氨基喋呤(6BA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中 依次加入6-苄氨基喋呤(6BA),再与 HRP 标记的6-苄氨基喋呤(6BA)抗 体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的6-苄氨基喋呤(6BA)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标 准曲线计算样品中植物6-苄氨基喋呤(6BA)浓度。
操作步骤:
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。
48ng/L | 5 号标准品 | 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
24ng/L | 4 号标准品 | 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
12ng/L | 3 号标准品 | 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
6ng/L | 2 号标准品 | 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
3ng/L | 1 号标准品 | 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
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2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl, 然后再加待测样品 10µl(样品*终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
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