凝血酶基本信息作为药物的凝血酶为白色或类白色的冻干块状物或粉末。每1ml中含500单位的0.9%氯化钠溶液微显浑浊。作为生物活性物质的凝血酶是一种在人体抗凝,促凝的凝血级联反应中有着重要作用的生物活性蛋白。
凝血酶效价测定
纤维蛋白原溶液的制备 取纤维蛋白原约30mg,精密称定,用0.9% 氯化钠溶液1.5ml溶解,加凝血酶0.1ml(约3单位),快速摇匀,室温放置约1小时至完全凝固,取出凝固物,用水洗至洗出液加硝酸银试液不产生浑浊,在105℃干燥3小时,称取重量,计算纤维蛋白原中含凝固物的含量(%)。然后用0.9%氯化钠溶液制成含0.2%凝固物的纤维蛋白原溶液,用0.05mol/L磷酸氢二钠溶液或0.05mol/L磷酸二氢钠溶液调节pH值至7.0~7.4,再用0.9%氯化钠溶液稀释成含0.1%凝固物的溶液,备用。
标准曲线的制备 取凝血酶标准品,用0.9%氯化钠溶液分别制成每1ml中含5.0单位、6.4单位、8.0单位、10.0单位的标准品溶液。另取内径1cm、长10cm的试管4支,各精密加入纤维蛋白原溶液0.9ml,置37℃±0.5℃水浴中保温5分钟,再分别精密量取上述4种浓度的标准品溶液各0.1ml,迅速加入上述各试管中,立即计时、摇匀,置37℃±0.5℃水浴中,观察纤维蛋白的初凝时间,每种浓度测5次,求平均值(5次测定之值与*小值的差不得超过平均值的10%,否则重测)。标准品溶液的浓度应控制凝结时间在14~60秒为宜。在双对数坐标纸上,以每管中标准品实际效价(单位)为横坐标,凝结时间(秒) 为纵坐标,绘制标准曲线。
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