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柱层析硅胶多种目数现货供应


发布日期:[2021/5/10 14:28:19] 共阅[434]次
柱层析硅胶多种目数现货供应


硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 般情况下性较大的物质易被硅胶吸附,性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。


相关产品如下:

柱层析硅胶,100-200目
柱层析硅胶,200-300目
柱层析硅胶,试剂300-400目


1.称量。200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果难分,也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。

2.搅成匀浆。加入干硅胶体积倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是氯仿/醇体系,就用氯仿拌。
如果不能搅成匀浆,说明溶剂中含水量太大,尤其是乙酸乙酯/丙酮,如果不与水配伍走分配色谱的话,必须预先用无水硫酸钠久置干燥。氯仿用无水氯化钙干燥,以除去1%的醇。如果样品对酸敏感,不能用氯仿体系过柱。

3.装柱。将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约1/3体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆次倾入蓄液球内。随着沉降,会有些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中。

4.压实。沉降完成后,加入更多的石油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积。无论走常压柱或加压柱,都应进行这步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

5.上样。干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后,加入些洗脱剂,再将团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂,而不会冲坏硅胶表面。

6.过柱和收集。柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。太低的洗脱强度并不好,推荐用梯度洗脱。收集的例子:10mg上样量,1g硅胶H,0.5ml收馏分;1-2g上样量,50g硅胶(200-300目),20-50ml收馏分。

7.检测。要更多地使用用喷显剂,如果仅用紫外灯,会损失较多产品,紫外的灵敏度般比喷显剂低1-2个数量。

8.送谱。收集的产品旋干,在送谱通常需要重结晶。如果样品太少或为液体,可过小凝胶柱,作为送谱的后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。

原创作者:南京亿迅生物科技有限公司

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