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邮箱:3256942041@qq.com
 
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总胆固醇(T-CHO)试剂盒检测方法


发布日期:[2020/6/23 15:26:59] 共阅[63]次

总胆固醇(T-CHO)试剂盒检测方法


血清总胆固醇(Total Cholesterol,TC)是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇的总和,包括游离胆固醇和胆固醇酯。人体的胆固醇除来自食物外,还可在体内由乙酰辅酶A合成,成人肝脏和小肠可提供约90%的内源性胆固醇。血清总胆固醇水平受年龄、家族、性别、遗传、饮食、精神等多种因素的影响,男性高于女性,体力劳动者低于脑力劳动者。由于血清总胆固醇与动脉粥样硬化、冠心病、脑卒中等心脑血管疾病关系密切,血清总胆固醇测定已成为血脂分析的常规项目。


本试剂盒采用 COD-PAP 法配制,用于体外测定总胆固醇含量。适用于各型酶标仪、半自动或 全自动生化分析仪。


 

样本处理:

血清(浆):
直接测定,如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。

培养液样本:吸取培养液,1000 转/分,离心 10 分钟,取上清测定。

[注]:一般建议细胞密度在 100 万个/ml 以上。

组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例,加入9 倍体积的匀浆介 质,冰水浴条件下机械匀浆,2500 转/分,离心 10 分钟,取上清液待测。

[注]:
1、如组织样本不存在高脂样本,匀浆介质统一用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生理盐水进行提取。 
2、如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本,匀浆介质统一用无水乙醇进行提取。


总胆固醇(T-CHO)试剂盒检测方法


细胞样本:

A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出,1000 转/分,离心 10 分钟,弃上清液,留细胞沉淀;用等渗缓冲液(推荐 0.1mol/L、pH7~7.4 磷酸盐缓冲液)清洗 1~2 次,同样 1000 转/分,离心 10 分钟,弃上清液,留细胞沉淀;

B、细胞破碎:加入 0.2~0.3ml 的匀浆介质(推荐 0.1mol/L、pH7~7.4 磷酸盐缓冲液或生理 盐水)进行匀浆,冰水浴条件下超声破碎(功率 300W,3~5 秒/次,间隔 30 秒,重复 3~5 次 ) 或手 动匀浆, 制 备好的匀 浆 液不离心 待 测。也可 采 用裂解液 裂 解 ( 推荐 TritonX-100,1~2%,裂解 30~40 分钟),裂解好的液体不离心直接测定。 


注意事项:

 

1、本产品仅用于科研,不得用于临床诊断,切勿服用。


2、样品含量如超出检测范围上限时,可用生理盐水稀释样本后进行测定,测定结果乘以稀释倍数。


3、试剂防止葡萄糖、胆固醇等试剂的污染。


4、试剂与样本量可按照全自动生化分析仪的要求,按照 1:100 的比例减。

 

总胆固醇(T-CHO)试剂盒检测方法

原创作者:上海信帆生物科研所

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