总胆固醇(T-CHO)试剂盒检测方法


血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇的总和，包括游离胆固醇和胆固醇酯。人体的胆固醇除来自食物外，还可在体内由乙酰辅酶A合成，成人肝脏和小肠可提供约90%的内源性胆固醇。血清总胆固醇水平受年龄、家族、性别、遗传、饮食、精神等多种因素的影响，男性高于女性，体力劳动者低于脑力劳动者。由于血清总胆固醇与动脉粥样硬化、冠心病、脑卒中等心脑血管疾病关系密切，血清总胆固醇测定已成为血脂分析的常规项目。


本试剂盒采用 COD-PAP 法配制，用于体外测定总胆固醇含量。适用于各型酶标仪、半自动或 全自动生化分析仪。

 

样本处理:

血清(浆)：直接测定，如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。

培养液样本：吸取培养液，1000 转/分，离心 10 分钟，取上清测定。

[注]：一般建议细胞密度在 100 万个/ml 以上。

组织样本：准确称取组织重量，按重量(g):体积(ml)=1:9的比例，加入9 倍体积的匀浆介 质，冰水浴条件下机械匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清液待测。

[注]:
1、如组织样本不存在高脂样本，匀浆介质统一用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生理盐水进行提取。 
2、如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本，匀浆介质统一用无水乙醇进行提取。

总胆固醇(T-CHO)试剂盒检测方法


细胞样本：

A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出，1000 转/分，离心 10 分钟，弃上清液，留细胞沉淀；用等渗缓冲液（推荐 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液）清洗 1～2 次，同样 1000 转/分，离心 10 分钟，弃上清液，留细胞沉淀；

B、细胞破碎:加入 0.2～0.3ml 的匀浆介质（推荐 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液或生理 盐水）进行匀浆，冰水浴条件下超声破碎(功率 300W，3～5 秒/次，间隔 30 秒,重复 3～5 次 ) 或手 动匀浆， 制 备好的匀 浆 液不离心 待 测。也可 采 用裂解液 裂 解 ( 推荐 TritonX-100,1～2%,裂解 30～40 分钟)，裂解好的液体不离心直接测定。 

注意事项：

1、本产品仅用于科研，不得用于临床诊断，切勿服用。

2、样品含量如超出检测范围上限时，可用生理盐水稀释样本后进行测定，测定结果乘以稀释倍数。

3、试剂防止葡萄糖、胆固醇等试剂的污染。

4、试剂与样本量可按照全自动生化分析仪的要求，按照 1：100 的比例减。

总胆固醇(T-CHO)试剂盒检测方法